Risques du potentiel zoonotique de certains protozoaires parasites chez les populations infantiles et adultes vivants en zone urbaine et rurale via les animaux domestiques

Abstract

Notre but de travail est de déterminer la prévalence des parasites intestinaux chez les bovins dans la Wilaya de Batna en fonction de certains facteurs de risque tels que l’âge et le sexe. Par l’usage de différentes techniques classiques et moléculaires et l’effet de transmission chez l’être humain. L'étude a été menée sur les veaux dont la tranche d'âge de 1 jour à 2 ans où nous avons analysé 620 échantillons de matières fécales d'animaux et 641 échantillons humains pour une période de deux ans. La technique de Ziehl–Neelsen modifiée par Henriksen et Pohlenz est utilisée pour la détection de Cryptosporidium puis associée à un test d’immunofluorescence et un test de lugol pour la détection de Giardia dans les selles des bovins et des humains.Chez les bovins, 48.7% de veaux sont infectés par Cryptosporidium spp. les cryptosporidies isolés chez veaux diarrhéiques que non diarrhéiques, avec des taux respectifs 60,4% et 12.0% respectivement.En plus une grande fréquence d’excrétion du parasite est notée chez les animaux âgés entre 2 et 3 semaines (25.1%).Sachant que le sexe n’a aucune influence sur les incidences des cryptosporidies chez les veaux mais pour Giardia aucun échantillon n’a été révélé positif. Chez les humains, parmi les échantillons testés ;un cas positif de Cryptosporidium spp.a été détecté.Les techniques moléculaires sont réalisées sur 66 échantillons fécaux des bovins. Un Seul sous type zoonotique (sous-type IIaA13G2R1) a pu être identifié parmi 24 isolats génotypés. Pour analyser la prévalence de différents parasites dans les échantillons fécaux de bovins, la méthode FLOTAC a été utilisée pour 174 échantillons, et une autre méthode de flottation Mini-Flotac a été appliquée sur 220 échantillons. عادة ما يعاني العجول من الإسهال خاصة خلال فترة ما بعد الولادة ، وهذا الإسهال له أسباب كثيرة ، بما في ذلك : البكتيريا والفيروسات والطفيليات. هذه الحالة المرضية التي هي آفة حقيقية للماشية واعتبار الطفيليات من مسببات الإسهال للأبقار حديثي الولادة وأكد ذلك في الدراسات الوبائية والتجريبية التي أجريت في مختلف المناطق من العالم. هدفنا من هذه الدراسة هو تحديد انتشار الطفيليات المعوية في البقريات في ولاية باتنة على أساس بعض عوامل الخطر مثل العمر والجنس وذلك. بإستخدام مختلف التقنيات الكلاسيكية والجزيئية وتأثير انتقال هذه الطفيليات على الانسان . أجريت الدراسة على 641 عينة من براز الإنسان و عجول تتراوح أعمارهم من يوم إلى عامين قمنا فيها بتحليل 620 عينة من براز هذه العجول و وذلك لمدة عامين. للكشف عن Cryptosporidium تستعمل تقنيه Ziehl–Neelsen المعدله مرفقه بتقنيه الوسم المناعي وللكشف عن Giardia استعمل اختبارlugol وذلك في براز كل من العجول والانسان. عند الانسان ، في جميع العينات ، تم اكتشاف حالة إيجابية واحدة للـ .Cryptosporidium spp . كشف الفحص المباشر عن وجود: Ascaris lumbricoïdes (4,83%), Entamoeba coli (6,24%), Giardia intestinalis (7,17%), Endolymax nana (7,02%) و E .histolytica (8,89%). من بين العينات التي تمت معالجتها ، تم العثور على 150 (23.24٪) مصاب ، 63 (20.58٪) في المناطق الريفية و 87 (25.9٪) في المناطق الحضرية. يوجد معدل انتشار مرتفع للطفيليات بين الأطفال في المناطق الريفية 39.21٪ ولكن البالغين بنسبة 10.94٪ ولكن في المناطق الحضرية يبلغ معدل انتشار الطفيلي عند الأطفال ,0025٪ وفي البالغين 27.82 ٪. في الأبقار ، 48.7 ٪ من العجول مصابه بـه. Cryptosporidium spp. هذه الاخيره وجدت بكثره في العجول المصابه بالإسهال اكثر من والعجول الغير المصابه ،بنسب تقدر بـ 60.4 ٪ و 12.0 ٪ على التوالي. ولوحظ وجود تواتر أعلى لإفراز الطفيليات في الحيوانات التي تتراوح أعمارها بين 2 و 3 أسابيع (25.1 ٪) ، اما الجنس ليس له تأثير على نسبه هذا الطفيلي عند العجول ، لم يتم العثور على أي عينه ايجابيه لـ Giardia. التقنيات الجزيئية طبقت على 66 عينة البراز من الأبقار. كشف البحث عن مورثه ARNr 18S وتسلسل مورثه GP 60 في Cryptosporidium وجود ثلاثة أنواع: Cryptosporidium bovis (n = 14) ، ( C. ryanae (n = 6 و parvum (n=4) C.. تمكنا من التعرف على نوع فرعي واحد حيواني المنشأ لـ C. parvum (النوع IIaA13G2R1) من بين 24 عزلة وراثية. بالنسبه لجيارديا ، تم العثور على نسبة انتشار 6.06 ٪ بعد البحث عن مورثه .β-giardine الجمع بين Cryptosporidium spp. و Giardia في العجول المصابه بالإسهال لوحظ في اثنين منها، اما بالنسبة لنوع الجنس له تأثير على انتشار الجيارديا المعوية مع نسبة عالية في العجول الذكور من العجول الإناث ولكن بالنسبه لكريبتوسبوريديوم الجنس لا يوجد لديه تأثير. لتحليل انتشار الطفيليات المختلفة في عينات البراز البقري استخدمت طريقة FLOTAC علي 174 عينة ، الطفيليات التي تم تحديدها بهذه الطريقة هي: Autres Protozoaire 101(58.04%), Eimeria spp. 92 (52.87%), Strongles 47 (27.01%), Trichuris 1 (0.57%), Paramphistomes 4 (2.34%), Toxocara 2 (1.15%) . تم تطبيق طريقة أخرى للتعويم Mini-Flotac على 220 عينة ، حيث تم تحديدد الطفيليات التاليه : , Strongyles 22 (10 %) . Autres Protozoaires 94 (42,72 %)و Eimeria spp. 81(36,81%),Toxocara 2(0.9%) Usually, calves suffer from diarrhea especially during the postpartum period, this diarrhea has many causes, including: Bacteria, viruses, parasites. Following this pathology which constitutes a real scourge for cattle breeding and that the involvement of parasites in the etiology of neonatal diarrhea was confirmed in epidemiological and experimental studies undertaken in different corners of the globe. Our goal is to determine the prevalence of intestinal parasites in these cattle in Batna based on certain risk factors such as age and sex. Through the use of different classical and molecular techniques and the transmission effect in humans. The study was conducted on 641 human feces samples and calves ranging in age from 1 day to 2 years where we analyzed 620 animal samples for a two-year period. The technique of Ziehl-Neelsen modified by Henriksen and Pohlenz is used for the detection of Cryptosporidium and then associated with the immunofluorescence test and Lugol test for the detection of Giardia in the stools of cattle and humans. In humans, in all samples 1 positive case for Cryptosporidium spp. is detected. Direct examination revealed the presence of: Ascaris lumbricoides (4.83%), Entamoeba coli (6.24%), Giardia intestinalis (7.17%), Endolymax nana (7.02%) and E. histolytic (8.89%). Of the subjects reviewed, 150 (23.24%) were found infected, 63 (20.58%) in rural areas and 87 (25.9%) in urban areas. Parasitism has a high prevalence among children in rural areas 39.21% but adults have a prevalence of 10.94% but for the urban area the prevalence of parasitism in children is 25.00 % and in adults is 27.82 %. We found that in In cattle 48.7% of the calf population is infected with Cryptosporidium spp. Cryptosporidia isolated from diarrheal calves and non-diarrheal calves, with respective rates 60.4% and 12.0% respectively. A higher frequency of parasite excretion is noted in animals aged between 2 and 3 weeks (25.1%).We know that the sex has no influence on the incidence of cryptosporidium in calves, for Giardia no sample has been revealed positive. Molecular techniques are performed on 66 faecal samples from cattle. The search for the 18S rRNA gene and the sequencing of the GP 60 gene in Cryptosporidium revealed the presence of three species: Cryptosporidium bovis (n = 14), C. ryanae(n = 6) and C. parvum (n = 4). Only one zoonotic subtype for C. parvum (subtype IIaA13G2R1) could be identified among 24 genotyped isolates. About Giardia, a prevalence of 6.06% was found after searching for the β-giardine gene. The association of the two parasites Cryptosporidium and Giardia in diarrheal calves were observed in two calves, for sex has an effect on the prevalence of Giardia intestinalis with a high rate in male calves than female calves but for Cryptosporidium the sex has no influence. To analyze the prevalence of different parasites in bovine faecal specimens the FLOTAC method was used for 174 samples, the parasites identified by this method are Other Protozoa101(58.04%), Eimeria spp. 92(52.87%), Strongles47 (27.01%), Trichuris1 (0.57%), Paramphistomes4 (2.34%), Toxocara2 (1.15%). Another method of flotation is mini-Flotacwich applied on 220 samples, the identification of the parasites was executed : Strongle22 (10%), Toxocara2(0.9 %), Eimeria spp. 81 (36.81%) and Other Protozoa 94 (42.72%).