Criblage d'activité protéases chez des Archaea Halophiles

Taza Habiba, Zitouni Nadjat

Criblage d'activité protéases chez des Archaea Halophiles

Taza Habiba, Zitouni Nadjat

URI: http://dspace.univ-djelfa.dz:8080/xmlui/handle/123456789/4519

Date: 2019

Abstract:

Les protéases sont des enzymes qui clivent les liaisons peptidiques des protéines et des peptides dans des milieux aqueux. Lesquelles occupent une importance pivotante avec respect pour leurs applications industrielles. Le but de cette étude est de produire et de caractériser les protéases extraites à partir de la souche C3.Pour cela, une cinétique de croissance et de production suivi de tests d’activités protéolytiques ont permis de déterminer l’optimum de production. La fermentation liquide à base de lait écrémé à permis d’obtenir des protéases. Les différents tests effectués sur l’enzyme ont permis la caractérisation de cette dernière comme étant stable et active à de fortes concentrations en sel (extremophiles) . Il s'agit donc d’une haloenzyme, neutrophile(optimum d’activité à pH=7.0), mésophile(optimum d’activité à une température égale à 30°C), thermostable à 70°C pendant 280min et ne s’agit pas d’une métallo protéase (résistance à l’agent chélatant EDTA). En conclusion, la souche C3 et ces protéases extracellulaires avec un caractère neutrophile, thermoactif, et thermostable signifie leur application potentielle dans l’industrie pharmaceutique, alimentaire et détergente.

Description:

L’analyse de la diversité des communautés microbiennes d’environnements extrêmes ouvre des voies à la recherche de capacités biotechnologiques chez ces microorganismes. Le but de cette étude est de produire et de caractériser les protéases extraites à partir de la souche C3.Une culture de la souche C3sur MSH complet solide a permis une revivification de cette dernière. Les tests de croissance de la souche C3ont donné une activité protéasique maximale de diamètre 8.22mm en 7 jours et demi qui est l’optimum de production. La fermentation liquide a permis une production des protéases extracellulaires. Une centrifugation a été effectuée pour la récupération de l’enzyme. L’étude des propriétés physicochimiques de la protéase a donné les paramètres suivants : pH optimum de 7, température optimale de 30°C, thermo-stabilité de l’enzyme pendant 280 min à 70 °C, exigeant une forte concentration en NaCl ( 20% de NaCl); par ailleurs l’étude de l’effet de l’effecteur EDTA sur l’activité enzymatique a montré qu’il ne s’agit pas d’une métalloprotéine, du fait que l’enzyme est insensible à cette effecteur. La stabilité aux haute forces ionique et à une température de 70°C et au pH neutre avec une tendance acide (3-7) fait que la protéase de la souche C3 soit une candidate appropriée pour les procédés industriels, utilisé comme additifs dans les détergents pour la lessive ayant pour but de faciliter la libération des matières protéiniques dans des taches comme celles du lait et du sang, les produits pharmaceutiques pour la préparation de médicaments, les produits alimentaire ces enzymes ont été utilisés à des fins diverses, les processus de gestion des déchets et les unités de récupération de l’argent (Dammak et al., 2016) sont effectuées par plusieurs méthodes parmi elles :la combustion des films directement l’oxydation de l’argent métallique, puis l’électrolyse en décapant la couche de gélatine d’argent en utilisant des enzymes microbiennes spécifiquement des protéines alcalines et en éliminant la couche d’argent de gélatine en utilisant différents produits chimiques . La récupération de l’argent par la combustion des films crée la pollution de l’environnement et les risques pour la santé. D’autre part, l’enzyme provenant de la source microbienne casse la couche de gélatine intégrée à l’argent dans les films créant un décapage sans pollution (Sawant and Nagendran (2014)).

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